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다지표 진단 기술 (AptoMIA)

압타머 정량 기술

압타머는 핵산 물질로 이루어져 있기 때문에 혼성화 (hybridization) 기법 및 PCR 증폭이 가능합니다. 이러한 물질적 특성에 기반하여 바이오마커들을 직접 정량하는 대신, 표적 단백질들과 결합된 압타머들의 농도를 측정하여 바이오마커들의 농도를 간접적으로 정량 분석 할 수 있습니다.

당사는 압타머들의 농도를 정량하는 방법으로서 비드 마이크로어레이 (bead microarray)기술과 mPCR (multiplex PCR) 기술을 보유하고 있으며, 측정하고자 하는 바이오마커의 수에 따라 정량 방식을 결정합니다.

구분Bead MicroarraymPCR
검출 한계우수 (10-12~10-15M)매우 우수 (10-18M)
동시 검출 표적수최대 100종5종 미만
변동율 (%CV)10% 미만5% 미만
어세이 사용 목적질환 바이오마커 선별 또는 5종 이상 다지표 진단에 용이5종 이하 다지표 진단에 용이

방법 1. Bead Microarray

  • 루미넥스 (Luminex) 비드 기반의 분석 기술로 혼성화 (hybridization) 기법을 이용하는 압타머 정량 기술
  • 압타머와 상보적인 프라이머가 고정되어 있는 루미넥스 비드에 프라이머-압타머-프라이머 구조를 형성시켜 단백질을 정량
  • 루미넥스 미소구체 제조 시 Infrared dye와 Red dye의 조합을 통해 각각의 미소구체에 식별코드를 부여할 수 있기 때문에, 한 가지 시료내에서 최대 100가지의 분석이 동시 수행 가능
  • 측정하고자 하는 바이오마커의 수가 5종 이상일 때 적용

방법 2. Multiplex PCR

  • 각 압타머를 선택적으로 증폭 및 측정할 수 있는 프라이머 (primers) 와 프루브 (probes)를 적용하여 다수의 바이오마커를 동시에 정량하는 기술
  • 한 반응액 내에서 다수의 단백질-압타머 결합체를 형성 한 후, 결합체로부터 해리된 압타머들을 실시간 증폭하는 기술로 시간과 비용 절감 및 검출한계가 매우 우수
  • 측정하고자 하는 바이오마커의 수가 5종 미만일 때 적용
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