압타머 발굴기술 (SELEX)
SELEX는 다양한 형태를 가지는 무수히 많은 핵산 라이브러리로부터 출발하여 표적분자에 매우 우수한 결합력과 특이성을 보이는 압타머를 발굴할 수 있는 기술입니다.
1990년 미국 콜로라도 대학의 Larry Gold 박사 연구팀에서 SELEX 기술이 최초로 개발되었으며 이 후 많은 표적분자들에 특이적으로 결합하는 압타머가 발굴되었습니다. 무수히 많은 다양성을 가지는 핵산 (DNA/RNA) 라이브러리를 표적분자와 결합시킨 후 표적분자에 결합하지 않는 핵산분자들은 제거하면 표적분자에 높은 친화력을 가지는 핵산분자들만 선별이 됩니다. 선별된 핵산분자들을 PCR 기법으로 증폭시킨 후 상기 과정을 수차례 반복하면, 표적분자에 대해 높은 특이도를 가지는 핵산분자만 응집 (enrichment) 시킬 수 있습니다. 응집된 핵산분자 라이브러리의 서열을 확인하고 친화 어세이 (affinity assay) 분석을 통해 우수한 성능을 가진 압타머 클론들을 확보하게 됩니다.
변형핵산 SELEX와 ViroSELEX 독자적인 플랫폼 기술을 구축함으로써
응용제품 개발에 적합한 고성능 압타머 발굴기술 확보
01 변형핵산 SELEX
다양성과 결합력이 증대된 변형핵산 DNA 라이브러리를 사용하여 고성능 압타머를 발굴하는 기술
02 ViroSELEX
표적의 실제 환경과 유사한 환경을 대리바이러스 표면에 구현하여 압타머의 실제 응용성을 증대시킨 기술
03 NGS 서열 분석
서열 패턴 및 구조 유사성을 입체적으로 비교하여 최적의 압타머 클론을 선별하는 기술
변형핵산 SELEX
- 변형핵산 (2세대) SELEX 기술은 1세대 (천연 핵산 라이브러리) SELEX 기술에 비해 월등한 성능의 압타머를 높은 성공률로 발굴
- 결합 참여도가 높은 소수성 그룹(아미노산 유사체들)을 핵산 염기에 도입하여 표적단백질과 결합력 증대
- 라이브러리 다양성 증대로 압타머 발굴 성공률 향상
ViroSELEX
- 압타머의 특이도와 응용성이 획기적으로 개선된 플랫폼 기술
- 대리바이러스 표면에 원형상태와 유사한 표적단백질을 발현시켜 SELEX에 사용하는 기술
- 치료제 표적으로 유용한 세포막단백질 압타머 발굴에 특화된 기술
암 치료제의 표적 바이오마커는 대부분 생체 내 세포막 단백질로 존재
→ 세포막 단백질에 특이적으로 결합하는 압타머 발굴이 중요
대리바이러스 표면에 원형상태의 세포막 단백질과 유사한 조건으로
표적 단백질을 발현시켜 SELEX 진행 (PCT/KR2018/009662)
NGS 서열분석
- NGS 분석기술을 이용하여 SELEX 과정 중 서열의 증감 패턴을 선별 과정별로 추적
- 높은 특이성과 우수한 결합력을 가지는 클론 획득 성공률을 높이는 기술
라운드별 서열 분석을 통한
최적의 서열 선별
바코드(barcode) 프라이머를
활용한 라운드 pool 동시 분석
라이브러리의
다양성 검증
NGS 서열 분석 기술을 통한
압타머쌍 발굴
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